هل سبق لك أن أردت زراعة البكتيريا من أجل مشروع علمي أو لمجرد التسلية الأمر بسيط بشكل مدهش، كل ما تحتاجه هو بعض أجار الطعام (جل خاص)، وعدد قليل من أطباق بتري المعقمة (وعاء زجاجي مسطح، مستدير، شفاف مع غطاء) وبعض مصادر البكتيريا المفيدة.
خطوات
تحضير أطباق بتري
1 تحضير أجار. الأجار مادة شبيهة بالهلام تستخدم لزراعة البكتيريا وهي مصنوعة من نوع من الطحالب الحمراء التي توفر سطحًا مثاليًا للنمو للعديد من أنواع البكتيريا المختلفة. تحتوي بعض أنواع الآجار على عناصر مغذية مضافة (مثل دم الأغنام) تساعد على تحفيز نمو بكتيري أكثر نشاطًا.
- أسهل أنواع الآجار لاستخدامها في هذه التجربة هو أجار الطعام، والذي يأتي في شكل مسحوق. استخدم قدر ما تحتاجه من أجار، ولكن ليس أقل من 1.2 جرام (حوالي نصف ملعقة صغيرة) من المسحوق لكل طبق بتري 10 سم تستخدمه.
- قلب 1/2 ملعقة صغيرة من مسحوق أجار الطعام في 60 مل (حوالي 1/4 كوب) من الماء الساخن في وعاء أو طبق عازل للحرارة. ضاعف هذه الكميات لأي عدد من أطباق بتري تخطط لاستخدامها.
- ضع الوعاء أو الطبق في الميكروويف واغليه لمدة دقيقة، راقبها للتأكد من أن محلول الأجار لا يغلي ولا ينسكب.
- عندما يكون المحلول جاهزًا، يجب إذابة مسحوق الأجار تمامًا ويجب أن يكون السائل صافياً.
- اترك محلول الأجار يبرد لعدة دقائق قبل المتابعة. X موارد البحث
2 تحضير أطباق بتري. أطباق بتري عبارة عن حاويات صغيرة مسطحة القاع مصنوعة من الزجاج أو البلاستيك الشفاف لها نصفان – علوي وسفلي – ينزلقان في بعضهما البعض. هذا يحمي المحتويات من أي هواء ملوث غير مرغوب فيه ولكنه يسمح لأي غازات تسببها البكتيريا بالهروب.
- يجب تعقيم أطباق بتري بالكامل قبل استخدامها في زراعة البكتيريا، وإلا فقد تتأثر نتائج التجربة. يجب تعقيم أطباق بتري المشتراة حديثًا وإغلاقها في كيس بلاستيكي.
- أخرج طبق بتري من عبوته وافصل بين النصفين. اسكب محلول الأجار الدافئ بحذر شديد في النصف السفلي من طبق بتري، بما يكفي لتشكيل طبقة فوق قاع الطبق مباشرةً.
- استبدل النصف العلوي من الطبق بسرعة لمنع أي بكتيريا محمولة بالهواء من تلويث التجربة. اتركي أطباق بتري جانبًا لمدة 30 دقيقة إلى ساعتين حتى يبرد محلول الأجار ويتماسك (سيشبه الهلام الصلب عندما يصبح جاهزًا). X موارد البحث
3 قم بتبريد أطباق بتري حتى تصبح جاهزًا لاستخدامها. إذا لم تكن مستعدًا لاستخدام أطباق بتري المليئة بالأجار في الثلاجة، فيجب عليك وضعها في الثلاجة فورًا حتى تصبح جاهزًا لمواصلة التجربة.
- إن الاحتفاظ بأطباق بتري في الثلاجة يمنع الماء الموجود بداخلها من التبخر (تحتاج البكتيريا إلى بيئة رطبة لتنمو)، كما يسمح لسطح الأجار بالتصلب قليلاً، مما يمنع قطعه أو سحبه عند نقل عينات البكتيريا.
- يجب وضع الأطباق رأسًا على عقب عند حفظها في الثلاجة. يساعد هذا في منع أي بخار يتكثف على الغطاء من التساقط وإزعاج سطح النمو.
- يمكن حفظ أطباق بتري المليئة بالأجار في الثلاجة لمدة تصل إلى شهرين. أخرجها من الثلاجة عندما تستعد لاستخدامها، ودعها تصل إلى درجة حرارة الغرفة قبل إدخال العينات الخاصة بك.
فرط نمو البكتيريا
1 أدخل البكتيريا في أطباق بتري. بمجرد أن يتم ضبط محلول الأجار ووصول أطباق بتري إلى درجة حرارة الغرفة، تكون جاهزًا للجزء المثير للاهتمام – إدخال البكتيريا. هناك طريقتان للقيام بذلك، إما من خلال الاتصال المباشر أو جمع العينات.
الاتصال المباشر عندما تنتقل البكتيريا إلى طبق بتري عن طريق الاتصال المباشر، مثل لمس الأجار. واحدة من أكثر الطرق شيوعًا للقيام بذلك هي الضغط بلطف على طرف إصبعك (إما قبل غسل يديك أو بعده) على سطح الأجار، ولكن يمكنك أيضًا محاولة الضغط على ظفرك أو سطح عملة قديمة على الأجار، أو حتى وضع شعرة صغيرة أو قطرة من الحليب في الطبق. استخدم مخيلتك.
جمع العينات بهذه الطريقة، يمكنك جمع البكتيريا من أي سطح تقريبًا ونقلها إلى طبق بتري. كل ما تحتاجه هو بعض أعواد القطن النظيفة. ما عليك سوى أخذ مسحة ومسحها على أي سطح يخطر ببالك. داخل فمك، على مقبض الباب، أو المفاتيح الموجودة على لوحة مفاتيح الكمبيوتر، أو الأزرار الموجودة على جهاز التحكم عن بعد، ثم استخدمها لمسح سطح الأجار (دون قطعه). هذه الأماكن هي موطن لكثير من البكتيريا ويجب أن تحصل على نتائج مثيرة (ومثيرة للاشمئزاز) في غضون يومين.
- يمكنك وضع أكثر من عينة بكتيريا في كل طبق بتري إذا أردت. كل ما عليك فعله هو تقسيم الطبق إلى أرباع ومسح عينة من البكتيريا المختلفة في كل منها.
- نوصي بأن تحافظ على ربع طبق بتري خاليًا من البكتيريا لاستخدامه كعنصر تحكم. يمكّنك هذا من معرفة ما إذا كان الأجار قد تلوث قبل إدخال عينات البكتيريا.
2 قم بتسمية أطباق بتري وإغلاقها. بعد إدخال البكتيريا، عليك إعادة الغطاء إلى طبق بتري وإغلاقه بشريط لاصق.
- تأكد من تسمية كل طبق بتري بمصدر البكتيريا التي يحتوي عليها، وإلا فلن تتمكن من التمييز بينها. يمكنك القيام بذلك باستخدام شريط لاصق وعلامة.
- يمكنك وضع كل طبق بتري في كيس بسحاب كإجراء احترازي إضافي. يوفر هذا حماية إضافية ضد مستعمرات البكتيريا الخطرة التي قد تتطور، ويمكنك من رؤية المحتويات.
3 ضع أطباق بتري في مكان مظلم ودافئ. اترك أطباق بتري في مكان دافئ ومظلم دون إزعاج، لأن البكتيريا يمكن أن تنمو لعدة أيام. تذكر إبقاء الأطباق مقلوبة حتى لا تؤثر المياه المتقطرة على نمو البكتيريا.
- تتراوح درجة الحرارة المثالية لنمو البكتيريا بين 20-37 درجة مئوية. يمكنك وضع أطباق بتري في مكان أكثر برودة إذا لزم الأمر، لكن البكتيريا ستنمو ببطء أكبر.
- اترك البكتيريا لتنمو لمدة 4-6 أيام، مما يمنح الزرع وقتًا كافيًا للنمو. قد تلاحظ رائحة الأطباق عندما تبدأ البكتيريا في النمو.
4 اكتب نتائجك. بعد يومين، ستلاحظ وجود تنوع كبير من البكتيريا والعفن والفطريات داخل كل طبق بتري.
- استخدم دفتر ملاحظات لتدوين ملاحظاتك على محتويات كل لوحة وربما تصل إلى استنتاج بشأن المكان الذي يحتوي على أكبر عدد من البكتيريا.
- هل كان ذلك داخل فمك أو على مقبض الباب أو على أزرار جهاز التحكم عن بعد قد تفاجئك النتائج.
- إذا كنت ترغب في ذلك، يمكنك قياس النمو اليومي لمستعمرات البكتيريا باستخدام قلم تحديد لرسم دائرة حول كل مستعمرة في الجزء السفلي من طبق بتري. بعد أيام قليلة، سترى مجموعة من الحلقات متمركزة في قاع كل طبق.
5 اختبر فعالية العوامل المضادة للبكتيريا. يعد إدخال عامل مضاد للبكتيريا (معقم لليدين، صابون، إلخ) في طبق بتري لاختبار فعالية التجربة تعديلًا مثيرًا للاهتمام.
- بعد إدخاله في طبق بتري، استخدم قطعة قطن لوضع قطرة صغيرة من جل مطهر لليدين أو صابون مطهر أو مطهر منزلي على مركز عينة البكتيريا، ثم تابع التجربة كالمعتاد.
- عندما ينمو في الطبق، يجب أن ترى حلقة أو “هالة” حول المكان الذي تضع فيه العامل المضاد للبكتيريا، لأنه لن ينمو هناك. يُعرف هذا باسم “منطقة القتل” (أو “منطقة الحظر” على وجه الدقة).
- يمكنك قياس فعالية العوامل المضادة للبكتيريا المختلفة بمقارنة حجم مناطق القتل في أطباق بتري. كلما كبرت منطقة القتل، زادت فعالية العامل المضاد للبكتيريا.
التخلص الآمن من البكتيريا
1 اتخذ احتياطات السلامة المناسبة. يجب اتخاذ احتياطات السلامة المناسبة قبل محاولة التخلص من أطباق بتري.
- لن تكون معظم البكتيريا التي تفرزها خطرة، لكن يمكن أن تكون مستعمرات البكتيريا الكبيرة، لذلك ستحتاج إلى قتلها قبل التخلص منها بمطهر منزلي.
- احمِ يديك من المطهر بارتداء قفازات مطاطية وعينيك بنظارات واقية وملابسك بارتداء مئزر.
2 صب المطهر في أطباق بتري. افتح طبق بتري وصب كمية صغيرة من المطهر بحذر على مستعمرات البكتيريا بينما تمسك الطبق فوق الحوض. سوف يدمر هذه البكتيريا.
- احرصي بشدة على عدم ملامسة المنظف لجلدك لأنه سيحرقها.
- ضع طبق بتري المعقم في كيس بسحاب وتخلص منه في سلة المهملات.
أفكار مفيدة
- جرب استخدام أجار البطاطس سكر العنب كوسيط للنمو. تحضير وسط دكستروز البطاطس بغلي 20 جم من البطاطس و 4 جم سكر العنب في أنبوب زجاجي. ضع هذا المحلول في طبق بتري واتركه يجف. خذ بعض المسحات القطنية المعقمة وافركها في أي مكان (جهاز التحكم، مقبض الباب، أنبوب الماء، إلخ). أغلق طبق بتري باستخدام غلاف بلاستيكي. اتركه ليحتضن لمدة 24 ساعة في مكان دافئ. افحص طبق بتري في اليوم التالي. يجب أن تكون قادرًا على رؤية مستعمرات البكتيريا.
تحذيرات
- لا تضع أبدًا أي شيء في الطبق من شأنه أن ينمو بكتيريا خطيرة (لا ينبغي أبدًا وضع سوائل الجسم في طبق بتري) وإذا أعيد فتح الطبق فقد يتسبب ذلك في مرض خطير.
== المصادر ==